童鞋們，今天來和大家聊聊實驗病理學(xué)方面的技術(shù)——冰凍切片。

冰凍切片因為不涉及乙醇脫水、二甲苯透明等有機(jī)溶劑處理步驟，能較好保存組織內(nèi)酶、糖及表面抗原的抗原性，是免疫組織化學(xué)和免疫熒光的常用切片方法。但是因為其切片厚度（8-10 µm）較石蠟切片（3-5 µm）厚，所以最后呈現(xiàn)的組織形態(tài)往往不如石蠟切片。

一般的操作步驟是將新鮮組織取出后，盡快埋入已有OCT（冰凍切片專用膠）的冷凍包埋盒內(nèi)。然后放入液氮中速凍，之后移入-80攝氏度保存。如果需要馬上切片，需要在冰凍切片機(jī)中平衡溫度大概20-30分鐘，再在-20攝氏度下進(jìn)行冰凍切片。對于脂肪組織需要更低一些的溫度，一般在-25攝氏度左右切片。

注意事項：

1.組織埋入OCT中需要展平，且OCT中不能有氣泡；

2.取材的組織不能帶有水分，否則容易形成冰晶，影響觀察；

3.組織取材需迅速，驟冷速度快且均勻，但是驟冷時間不能過長，最好不要超過1分鐘。

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